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大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Epithelial Cells】
     大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書大鼠角膜是唯的無(wú)血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能。分三層細(xì)胞層，外層即是上皮細(xì)胞。其中，角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫，能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng)。角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫酶，防止UV-和4-羥基壬烯醛對(duì)細(xì)胞造成傷害。大鼠角膜上皮細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的角膜組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過的角膜組織能使得角膜組織中上皮細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將上皮細(xì)胞分離開來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠角膜上皮細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的上皮原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的角膜上皮細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM組大鼠角膜上皮細(xì)胞織解離液（3×ml） （2）大鼠角膜上皮細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠角膜上皮細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）大鼠角膜上皮組織洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠角膜上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 00ml） （7）大鼠角膜上皮組織預(yù)備液（ x 00 ml） （8）大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

PCNA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IF  IP   ICC/IF    50 µg

erpinF2 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

Coagulation Factor VIII / FVIII / F8 抗體 (Heavy Chain), 兔單抗 ELISA    50 µg

CRELD 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

STMN / Stathmin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Pancreasin / Marapsin / PRSS27 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD59 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test

ITGA6 & ITGB Heterodimer 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

LDLR / LDL Receptor 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CD48 / SLAMF2 / BCM 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書哈巴苷英文名稱：Harpagide分子式：364.35分子量：C5H24O0：835927

2,3,9,0,6,7,23,24-八氟酞菁銅(II)(升華純)分子式：720.0英文名稱：2,3,9,0,6,7,23,24 -八氟酞菁銅（II）（升華純）：4865-60-9分子量： C32H8CuF8N8

3-(三氟甲)*氫氧銨英文名稱：3- (three f) phenyl three methyl hydroxide分子式：22.22分子量： C0H4F3NO：68254-4-

2-羥甲-3,4-二甲氧吡分子式：69.8英文名稱：2-, -3,4- two：72830-08-分子量： C8HNO3

2-氯-3-乙酰吡分子式：55.58英文名稱：2- -3- acetyl pyridine：55676-2-6分子量： C7H6ClNO

硝酸鋁九水合物分子式：375.3英文名稱：Aluminum nitrate nine hydrate：7784-27-2分子量： Al(NO3)3•9H2

吉拉爾特試劑T英文名稱：Giralt reagent T分子式：67.64分子量： C5H4ClN3O：23-46-6

PMBP(萃取劑Ⅱ)英文名稱：PMBP (extraction agent II)分子式：分子量：：

聚對(duì)二氯甲分子式：277.9英文名稱：Poly two chlorine toluene：28804-46-8分子量： C6H4Cl2

八氟萘分子式：248.075英文名稱：Eight f：33-72-4分子量： C8F8

注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。